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多肽是人体本身存在并且必须的活性物质,它普遍散布于人体到处,分子量在3000~1000Da之间,如今研讨较多的多肽包罗抗恶性肿瘤多肽、抗病毒多肽、抗菌肽、细胞因子模仿肽、诊断用多肽以及用于心血管疾病的多肽等等,多肽不但可用作药物,还可用作保健餐饮。
多肽的泉源
多肽的泉源有自然提取,分解肽和重组肽三种。大少数多肽都是化学分解的,只要十分少的多肽是泉源于自然提取,更大的肽一样平常指凌驾25个氨基酸必要经过重组DNA的技能表达消费。
Superdex Peptide 多肽分散纯化公用
Superdex peptide专门分散多肽类产品的高辨别率分子筛凝胶,分散的分子量范畴为100-7000Da,多肽的分子量巨细恰恰落在此范畴内,因而可以经过分子量的区别来举行分散。图中展示的是用Superdex Peptide PE 7.5/300来分散差别分子巨细的肽类。
离子互换层析
当分散的多肽带有电荷的时分,可以选择用离子互换的办法举行分散,通常离子互换会和RPC及凝胶过滤层析共同在一同去分散庞大的样品,如酶解多肽片断大概分解多肽以及自然泉源的多肽。下图为经过Q sepharose HP分散两个分子量差异很小的肽。表现用阴离子互换分散X肽和其前体x-k肽,它们之间的差别是x-k在c端多了一个lysine。
反相层析
多肽耐无机溶剂,多肽的可溶性通常是pH依赖性的,有些多肽的分散必要在很高的pH值条件下才干乐成分散,SOURCE RPC 因此最新技能分解的超高压疾速反相层析凝胶,在高pH值下仍然十分波动,可提供高辨别的中度和精密纯化。图中表现在碱性条件下用SOURCE 30 RPC分散检测仅仅相差一个氨基酸的多个血管告急肽。
多肽提取小贴士
· 多肽的紫外吸取通常在206nm-220nm,假如含有芬芳族的基团,紫外的吸取最大值会在268nm-280nm.
· Sephadex G-10通常用于对分解多肽的第一步脱盐。
· 上述差别的层析办法可以瓜代利用取得更纯的多肽。
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